ขั้นตอนเฉพาะสำหรับการสกัดคลอโรฟิลล์ผ่านการแบ่งตัวของเซลล์โดยใช้เครื่องบดเซลล์อัลตราโซนิก
Feb 20, 2024
เครื่องบดเซลล์อัลตราโซนิกใช้ผลการกระจายตัวของอัลตราซาวนด์ในของเหลวเพื่อสร้างโพรงอากาศ ซึ่งจะทำลายอนุภาคของแข็งหรือเนื้อเยื่อเซลล์ในของเหลว
การพัฒนาอุตสาหกรรมชีวภาพได้เพิ่มข้อกำหนดสำหรับการทดลองโดยใช้เครื่องบดเซลล์อัลตราโซนิก เช่น การวัดและการควบคุมอุณหภูมิตัวอย่าง การปรับปรุงระดับสติปัญญาของตัวอย่างการทำความเย็นที่อุณหภูมิต่ำและเครื่องจักรทั้งหมด และอื่นๆ
ขั้นตอนเฉพาะสำหรับการสกัดคลอโรฟิลล์ผ่านการบดเซลล์อัลตราโซนิกโดยใช้เครื่องบดเซลล์อัลตราโซนิก:
1. หมุนเหวี่ยงหรือกรองตัวอย่างน้ำ และติดตั้งเมมเบรนกรองไฟเบอร์อะซิเตทบนตัวกรองการดูด เทตัวอย่างน้ำเพื่อกรองในปริมาณเชิงปริมาณ และแรงดันลบระหว่างการกรองไม่ควรสูงเกินไป (ประมาณ 50kPa) หลังจากเก็บตัวอย่างน้ำแล้ว ให้วาดต่อไปเป็นเวลา 1-2 นาทีเพื่อลดความชื้นบนเมมเบรนของตัวกรอง หากต้องจัดเก็บระยะสั้นเป็นเวลา 1-2 วัน สามารถเก็บไว้ในตู้เย็นปกติเพื่อแช่แข็งได้ หากจำเป็นต้องจัดเก็บระยะยาว (30 วัน) ควรเก็บไว้ในตู้เย็นอุณหภูมิต่ำ (-20 องศา )
2. นำเมมเบรนกรองที่มีแพลงก์ตอนพืชออกมาแล้วทำให้แห้งที่อุณหภูมิต่ำในตู้เย็นเป็นเวลา 6-8 ชั่วโมง หั่นเป็นชิ้นเล็กๆ ด้วยกรรไกร แล้วใส่ลงในหลอดหมุนเหวี่ยงขนาด 5 มล. หรือ 10 มล. เติมอะซิโตน 90% 3-4 มิลลิลิตรเพื่อแช่ชิ้นส่วนให้อยู่ต่ำกว่าระดับของเหลว วางชิ้นส่วนไว้ในภาชนะอัลตราโซนิก และใช้คลื่นอัลตราโซนิกเพื่อทำลายเซลล์ของตัวอย่าง (การเปรียบเทียบการทดลองในเวลาและความถี่ที่ต่างกันเพื่ออำนวยความสะดวกในการระบุ * เวลาและความถี่ของการแตกแฟรกเมนต์สำหรับวิธีการแบบครบวงจร)
3. ปั่นแยกตัวอย่างภายใต้การแยกส่วนของเซลล์โดยใช้อัลตราซาวนด์โดยใช้เครื่องหมุนเหวี่ยง (3000-4000r/min) เป็นเวลา 10 นาที เทส่วนลอยเหนือตะกอนลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 5 มล. หรือ 10 มล. เจือจางเป็น 5 มล. หรือ 10 มล. ด้วยอะซิโตน 90% แล้วเขย่าให้เข้ากัน
4. วางส่วนเหนือตะกอนบนสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ และใช้จานวัดสีเส้นทางแสงขนาด 1 ซม. เพื่ออ่านค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 750 นาโนเมตร 663 นาโนเมตร 645 นาโนเมตร และ 630 นาโนเมตร ตามลำดับ ใช้อะซิโตน 90% เป็นการวัดค่าการดูดกลืนแสงเปล่าเพื่อแก้ไขค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง
